小鼠的灌胃給藥技術指導
從新藥研發角度來說,因口服給藥是方便、經濟安全的方式,在研究中較常用。動物實驗中,灌胃是口服給藥常用的方法,然而,看似簡單的幾步,可對于初學者常常因為手法不當而傷到氣道或食道,進而引起小鼠死或者逐漸消瘦至死亡。那么在灌胃的實驗中,我們究竟該掌握哪些注射手法和技巧呢?下面一起來看看!
灌胃: 借助器械(灌胃針)將藥物直接灌入動物胃內;
藥物循環途徑:食管→胃→小腸→小腸毛細血管(吸收入血)→空回腸靜脈→腸系膜上靜脈→肝門靜脈→肝→肝靜脈→下腔靜脈→右心房→右心室的吸收進入血液循環。
特點:
安全性高:各種給藥方式中,口服給藥是安全的;
可選的劑型比較多:只要保證藥物是均勻且穩定即可;
給藥體積大:小鼠:0.1-0.8ml(0.2 ml /10g);大鼠:1-3ml。
生物利用度低:藥物經胃腸道吸收,并存在胃腸道首過代謝和肝臟首過代謝,生物利用率相對較低,僅為靜脈的25-30%;對于部分化合物吸收不恒定,誤差較大。
灌胃的實驗步驟
一、準備工具
8/9/12號灌胃針頭配套1.0 ml注射器;如下圖為9號灌胃針頭/1.0 ml注射器,為了防止插入時造成損傷,針頭呈倒水滴型。
號灌胃針頭/1.0ml注射器
注:
灌胃針的分類:如下圖為小鼠灌胃常見灌胃針類別,根據尺寸不同有8/9/12號;另外還有直頭和彎頭區別;
灌胃針的選擇:尺寸大小的選擇一般可根據小鼠的年幼決定,如<30g,建議用8、9號;30g以上可選擇12號;其中9號針頭直徑小于常規的大頭,特別適用幼鼠;直頭彎頭可根據個人習慣選擇,初學者建議先適用彎頭練習;
灌胃針的獲取:可直接購買,不建議手動處理的注射器針頭,易刺傷小鼠食道;
灌胃針的深度:因為動物有個體差異,實驗前可先測量小鼠口腔至胃的距離,進而選擇合適長度的灌胃針,避免插入過深或過淺。小鼠入針一般3-4cm,大鼠一般4-6cm。
二、操作步驟
固定小鼠:用左手拇指和食指抓住鼠耳和頸部皮膚,用左手的無名指和小指夾其背部皮膚和尾部,使其頭、頸和身體在一條直線;若第一次抓取時不得當,一定要放開重抓,以免影響后續操作;
進針:右手持注射器(1ml的注射器配灌胃針頭),從一側嘴角進針,輕壓舌根,輕輕向前推,進入食管后會感覺有個刺空感,緩慢推進,一般當針插入小鼠3~4cm,即灌胃針的3/4時即可注射;
注意: 若感到阻力或動物掙扎比較厲害時,說明插錯位置,應馬上停止進針或將針拔出;待動物恢復平靜后,再次嘗試。